细胞货号： c4717
细胞缩写： a375细胞
┈技┈术(订购)┈热┈线：0┈2┈1┈5┈4┈3┈8┈5┈3┈1┈3(1┈5┈8┈0┈0┈5┈7┈6┈8┈6┈7)┈联┈系┈q┈q：3┈3┈0┈6┈0┈8┈4┈3┈5┈0；公司已合作单位有广西医科大学、中山大学附属肿瘤医院、复旦大学、南方医科大学、浙江大学医学院附属邵逸夫医院、深圳市孙逸仙心血管医院、福建省立医院、上海宠乐道宠物医院、中国科学院上海高等研究院、北京市昌平区中西医结合医院、中国医学科学院肿瘤医院、云南中医学院、绍兴市人民医院、汕头大学医学院、首都医科大学附属北京同仁医院、解放军总医院、上海瑞金医院、北京宣武医院、吉林大学第一临床医院、北京中医药大学附属东直门医院、北京天坛医院、复旦大学附属肿瘤医院、北京协和医院、河北医科大学第二医院、北京军区总医院、上海市中医医院、复旦大学附属儿科医院、浙江省中医院、上海华山医院、哈尔滨医科大学附属第一医院、西安唐都医院、上海长征医院、广州珠江医院、上海仁济医院、山西省眼科医院、航天中心医院、中山大学肿瘤医院、重庆新桥医院、浙江大学附属第二医院、解放军总医院(301医院)、北京大学第三医院、广州军区广州总院、北京大学人民医院、山西医科大学第二医院、、广州中医药大学第一附属医院、宁波市第二医院、广州南方医院、西京医院、复旦大学附属中山医院、浙江大学医学院附属第一医院、重庆医科大学第二医院、北京地坛医院、北京大学第一医院、中山大学附属第一医院、天津市肿瘤医院、武汉协和医院心血管疾病研究所、第二军医大学东方肝胆外科医院、北京肿瘤医院、湖南省肿瘤医院、南方医院、广东省人民医院、北京市广安门医院、北京同仁医院、复旦大学附属眼耳鼻喉科医院、上海仁济医院(西部)、山东大学齐鲁医院、海军总医院；细胞名称： a375(人皮肤黑色素瘤细胞)
t25培养瓶发货形式是用t25细胞培养瓶直接发货的形式。收到细胞后，拆开包装t25培养瓶的自封袋，不拆封口膜，表面喷75%酒精消毒后显微镜观察细胞状态（有条件可以拍下此时细胞照片）。将细胞放入37度培养箱平衡两小时以上，再处理细胞。首先将t25中培养基取出装好备用，如细胞密度高于80%，可以直接消化传代，相反则加入5-6ml培养基放回培养箱继续培养即可。背景资料： 见细胞说明书
细胞消化时注意把握消化时间，消化不够会导致吹打细胞时造成损伤，一般消化时间是2-3分钟，但以镜检时大部分细胞缩回球形为准，一般2次即可将细胞吹打下来，消化不够进行细胞吹打易损伤细胞。细胞系的冻存液配方：90%fbs+10%dmso，贴壁细胞若出现分布不均，成岛状生长，可将细胞进行消化，重悬打散细胞，加入新鲜培养基进行培养 细胞主要来源atcc、dsmz、ecacc、riken、promocell、sciencell、ecacc、jcrb、kclb、asterand、iclc以及少数国内外著名大学建系
公司提供的细胞代次低，活性好，质量有保障，全程为您的细胞相关科研实验研究保驾护航，技术一对一服务，细胞培养过程一条龙服务，代次： p4
规格： 复苏t25培养瓶(一瓶)或冻存1ml冻存管（两支）
细胞数： 1*10（6）
离心管发货形式是用15ml离心管发货的形式，只用于悬浮细胞发货。收到细胞后消毒处理及将细胞放入37度培养箱平衡两小时以上，再处理细胞。首先将t25中培养基取出装好备用(如果实验室没有t25培养瓶，可以暂时t75 培养瓶，加入10-15ml培养基,，建议10ml培养基，也可以使用t175 培养瓶，加入50-60ml培养基，培养瓶越大，需要的培养基越多。当然如果刚接收到细胞密度不够的话，一般不用大瓶子，先用小瓶子养起来再换大的，不然会长得很慢，严重的，会导致细胞死亡等危险)，平衡完成后，离心（1000rpm，3min）收集细胞，弃上清，用新的培养基重悬细胞并接种至培养瓶或皿中，放回培养箱继续培养。生物安全级别： 1
生物体： 人
组织来源： 皮肤
细胞形态： 成纤维细胞样
"t25瓶及离心管在培养箱平衡是为了让细胞尽快适应培养箱环境，同时使部分因运输导致脱落的细胞贴壁，此步骤非常必要。t25瓶如果在显微镜下可以看到部分不贴壁的细胞，可以收集上清后离心（1200rpm，5min）后，将沉淀用新的培养基重悬后接种至新的培养瓶或皿中。
部分细胞在运输过程中，由于不断震荡及环境不适，可能导致细胞破碎死亡，从而使培养基中漂浮很多细胞碎片及颗粒状物质。这种情况下，平衡后，贴壁细胞用pbs洗两遍再加新的培养基培养或者传代至新瓶中培养即可；悬浮细胞可以离心（1000rpm，3min）收集细胞，并用pbs重悬后再离心一次，再用新的培养基重悬并接种细胞。细胞特性：" 贴壁
特别注意：如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养，贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请优先选择直径6cm的培养皿进行传代培养，如果细胞为贴壁细胞，而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态，请将悬浮的细胞即时离心，加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养3天；同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基培养3天。3天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡，请及时联系实验室技术人员会跟进解决 95％（viability by trypan blue exclusion），冻存液中含有dmso请使用细胞级dmso，同时浓度不要太高，部分细胞在10%dmso条件下冻存会死亡，所以dmso浓度5%-8%是比较推荐的浓度。细胞冻存及复苏遵循慢冻快融的原则，即取0.2-0.3ml的冻存液重悬的细胞于一个冻存管中，与正常体积冻存的细胞共同冻存，至液氮后复苏检查冻存结果。冻检合格前，留一部分细胞继续培养，以防万一。
细胞检测： 细胞不含有hiv-1、hbv、hcv、支原体、细菌、酵母和真菌
培养条件： 选择此细胞合适的培养基(dmem低糖、dmem高糖、rpmi-1640、mccoy's 5a等培养基)89%和10%pbs及1%双抗(防止污染)或者此细胞的完全培养基或者此细胞的专用培养基；生长条件：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃(模拟人体正常温度培养，这也是体外培养合适的温度)
传代比例建议1:2-1:3，长得比较快的细胞可以1:3，比较慢的按1:2传代。传代后，建议不要使用传代前培养所使用的培养基，会有大量细胞碎片甚至导致细胞死亡的风险。细胞状态不好或者生长极慢的时候，可以通过增加血清浓度调整细胞状态及生长速度。请不要随意更换培养基，因实验需要，可以逐步驯化(让它们慢慢适应)。传代方法： 建议1:2-1:3 两天换液一次；公司提供部分atcc细胞有(限于页面篇幅，公司全部细胞并未展示，如有具体所需细胞，请咨询我们哦)；crl-1459|ccd-18co细胞；crl-2797|movas细胞；crl-1831|fhc细胞；crl-2638|ct26.wt [ct26wt]细胞；hb-8064|hep 3b2.1-7细胞；ccl-2.1|hela 229细胞；hb-8065|hep g2细胞；ccl-131|neuro-2a/n2a细胞；crl-2780|atrflox[mutatect]细胞；cl-188|ls174t细胞；crl-2547|panc 10.05细胞；hb-8065|hepg-2细胞；ccl-13|hela[chang liver]细胞；crl-2233|snu-398细胞；ccl-75.1|wi－38av13细胞；crl-5892|nci-h1755[h1755]细胞；crl5844|nci-h838[h838]细胞；crl-5875|nci-h1563[h1563]细胞；crl-5928|nci-h2170[h2170]细胞；crl-2177|sw 1271[sw-1271; sw1271]细胞；crl-5889|nci-h1703[h1703]细胞；crl-5826|nci-h226[h226]细胞；crl-5900|nci-h1869[h1869]细胞；htb-59|sw 900[sw-900; sw900]细胞；crl-1573|hek-293细胞；crl-1441|g401细胞；crl-1500|zr75-1细胞；crl-1504|zr75-30细胞；htb-126|hs-578t细胞；crl-1897|uacc812细胞；htb-111|an3 ca细胞；ccl-2.1|hela229细胞；crl-7924|hela-s3细胞；htb-81|du-145细胞；crl-11610|rwpe2细胞；crl-7002|hs 1.tes细胞；crl-7131|hs 181.tes细胞；crl-1740|lncap clone fgc细胞；ccl-240|hl60细胞；tib-54|wehi 22.1细胞；tib-152|jurkat,clone e6-1细胞；ccl-85|eb-3[eb3]细胞；htb-14|u87mg细胞；ccl-121|ht1080细胞；htb-12|sw 1088[sw-1088; sw1088]细胞；crl-7762|te 354.t细胞；crl-7761|te 353.sk细胞；crl-2061|sjcrh30[rc13; rms 13; sjrh30]细胞；crl-1608|45.6.tg1.7细胞；crl-1999|t/g ha-vsmc细胞；crl-11372|hfob 1.19细胞；tib-71|raw 264.7细胞；crl-6323|b16f1细胞；crl-6322|b16-fo细胞；crl-6475|b16f10细胞；crl-1830|hepa 1-6细胞；crl-1586|vero e6细胞；crl-2638|ct-26.wt细胞；crl-9096|cho/dhfr-细胞；crl-2755|emt6细胞；crl-1975|145-2c11细胞；crl-8179|cl.ly1+2-/9细胞；tib-75|bnl1me a.7r.1细胞；crl-1935|chl/iu[chl-11]细胞；crl-2594|mc3t3-e1 subclone 14细胞；crl-12557|7f2细胞；cl-173|3t3l1细胞；ccl-17|kb细胞；ccl-23|hep-2细胞；htb-43|fadu细胞；htb-135|hs-746t细胞；crl-1739|ags细胞；crl-5822|nci-n87细胞；htb-37|caco-2细胞；ccl-222|colo205细胞；ccl-220|colo320dm细胞；ccl-247|hct116细胞；ccl-244|hct-8细胞；htb-38|ht-29细胞；htb-40|hutu-80细胞；ccl-228|sw480细胞；ccl-227|sw620细胞；ccl-248|t84细胞；ccl-229|lovo细胞；crl-2577|rko细胞；crl-2579|rko-as45-1细胞；crl-2578|rko-e6细胞；cl-187|ls 180细胞；ccl-225|hct-15细胞；ccl-221|dld-1细胞；crl-1469|panc-1细胞；crl-1918|cfpac-1细胞；crl-1435|pc-3细胞；crl-1682|aspc-1细胞；crl-1687|bxpc-3细胞；crl-1492|ar42j细胞；crl-1420|miapaca-2细胞；crl-2172|sw1990细胞；htb-80|capan-ⅱ/capan-2细胞；crl-2119|hpac细胞；htb-52|sk-hep-1细胞；hb-8064|hep-3b细胞；crl-2235|snu-182细胞；crl-5803|nci-h1299细胞；crl-11233|thle-3细胞；ccl-249|ncl-h548细胞；
┈技┈术(销售)┈热┈线：零0┈贰2┈壹1┈伍5┈肆4┈叁3┈捌8┈伍5┈叁3┈壹1┈叁3(壹1┈伍5┈捌8┈零0┈零0┈伍5┈柒7┈陆6┈捌8┈陆6┈柒7)┈联┈系┈q┈q：叁3┈叁3┈零0┈陆6┈零0┈捌8┈肆4┈叁3┈伍5┈零0；冻存条件： 详见细胞说明书
冻存液配方：建议使用92%pbs+8%dmso，客户自身实验室所使用的冻存液也可以适用，血清浓度不低于30%，dsmo含量不高于12%即可。细胞请于细胞培养箱中培养，大部分细胞是37℃，5%co2，湿度100%环境下培养的。有极少部分细胞培养条件不一致，请仔细阅读相应的细胞说明书，使用正确的培养基及培养条件；细胞于培养瓶或皿中培养，加入适量说明书上标注的细胞相应完全培养基（一般液面高度2-3mm即可）。主要文献： "请具体查阅相关发表文章，接收细胞相关问题：如不能在收到细胞后及时操作细胞，t25及离心管发货的细胞将可以消毒后在37度过夜，血清发货的细胞在室温下静置1-2天（注意不要放冰箱），干冰发货的可以在确认干冰未完全升华时将细胞直接放回液氮或者-80度冰箱，若干冰完全升华，请即刻复苏细胞。
t25瓶及离心管在培养箱平衡是为了让细胞尽快适应培养箱环境，同时使部分因运输导致脱落的细胞贴壁，此步骤非常必要。t25瓶如果在显微镜下可以看到部分不贴壁的细胞，可以收集上清后离心（1200rpm，5min）后，将沉淀用新的培养基重悬后接种至新的培养瓶或皿中。
部分细胞在运输过程中，由于不断震荡及环境不适，可能导致细胞破碎死亡，从而使培养基中漂浮很多细胞碎片及颗粒状物质。这种情况下，平衡后，贴壁细胞用pbs洗两遍再加新的培养基培养或者传代至新瓶中培养即可；悬浮细胞可以离心（1000rpm，3min）收集细胞，并用pbs重悬后再离心一次，再用新的培养基重悬并接种细胞。"
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